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贝克曼DNA纯化试剂盒具体的提取流程是怎样的

更新时间:2021-06-21      浏览次数:987
   实验室工作中,经常会需要用到纯化的DNA,这时我们通常需要使用一个贝克曼DNA纯化试剂盒对目的DNA进行分离纯化。目前大多数试剂盒遵循相同的基本步骤:裂解,柱纯化,洗涤杂质,柱洗脱。然而,不同的盒子在完成每个步骤的方式上有很大的不同。
  贝克曼DNA纯化试剂盒提供了从各种来源的细菌培养液(革兰氏阳性或革兰氏阴性)中快速简单地提取基因组DNA的方法;一次可处理<3ml正处于指数生长期的细菌培养液(1x109细菌)。
  该试剂盒采用*的DNA吸附柱纯化方式,可在60分钟内同时进行一个或多个样品的纯化工作。纯化过程不需要用到酚氯仿抽提,也不需要用到耗时的异丙醇或乙醇沉淀。
  纯化DNA产物可直接用于PCR、酶切和杂交等实验。一次抽提可纯化出10-30μg的高质量的基因组DNA。此外,贝克曼DNA纯化试剂盒还可以抽提得到除基因组以外遗物质,包括质粒,Cosmid,BAC等。
  由于该方法采用溶菌酶(Lysozyme)和玻璃珠(0.1-0.2mm)共同作用来去除细胞壁,因而可高效地裂解细菌,保证DNA的有效回收。对于大多数的阴性或阳性细菌,只需使用溶菌酶。
  从正处于指数生长期的细菌培养液中收集细菌,细菌经溶菌酶去除细胞壁,蛋白酶消化细胞,然后用HiBind硅胶柱结合DNA,经过两次快速洗涤,最后将DNA溶解在灭菌水或低盐缓冲液中。

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