贝克曼流式细胞仪荧光微球制备常用的几种方法

更新时间：2021-06-17

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　　贝克曼流式细胞仪荧光微球通常是指形状为球形，直径在几纳米至几十微米之间，微球表面或内部负载有荧光物质，在受到一定的能量激发时能够发出荧光的微粒。与纯荧光化合物相比，荧光微球具有相对稳定的发光行为和形态结构。

　　制备方法：

　　1.物理吸附法

　　此方法主要靠载体与荧光分子之间通过分子间作用力结合形成贝克曼流式细胞仪荧光微球，如将非水溶性的荧光物质溶解在丙酮、乙醇等水溶性有机溶剂中,再将其与微球载体的水分散体系相混合,这时荧光物质即会析出并被吸附到微球表面,形成荧光微球。

　　2.自组装法

　　利用无机或有机微球为核,通过层层自组装法在其表面交替组装荧光聚电解质或荧光纳米粒子来制备荧光微球。这样得到的微球壳厚度可以很容易地通过改变循环的次数来控制,同时,壳的尺寸与形状可由所用核的尺度预先确定，而且这样得到的核壳微球具有与核显著差异的特殊性质(如不同的化学组成、良好的稳定性、高比表面积、不同的磁和光学性质）。

　　3.包埋法

　　基本原理是将荧光材料均匀分散在介质中,利用聚合反应、微胶囊化方法或分子自组装方法制备荧光微球。此方法制备出来的荧光微球一般都具有明显的核-壳结构，而且可以制备各种荧光微球,制备出的微球还可以包含多种荧光材料,因此可以发射出多个荧光信号。包埋法有两种制备方式:一种是荧光材料包覆在载体内部；一种是包覆在载体外部。

　　4.化学键合法

　　该方法也称为球外悬挂法。它是将表面带有功能基或是改性后的微球与表面有活性官能团的荧光分子发生化学反应,荧光物质以点状连接并分布到贝克曼流式细胞仪荧光微球表面上。

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